隨著工業(yè)的發(fā)展，汞污染越來(lái)越嚴(yán)重。由于汞的污染特性饲宛，不易分解及轉(zhuǎn)移服英。造成了食品中富集了各種含汞化合物圾浅，從而導(dǎo)致各種慢性等灾、急性汞中毒事件頻出喧撕。目前串飘，食品中汞的主要存在形式可分為無(wú)機(jī)汞和有機(jī)汞兩大類陪孩，其中有機(jī)汞的毒性遠(yuǎn)大于無(wú)機(jī)汞雁痪，無(wú)機(jī)汞主要是對(duì)腎臟有毒性作用，而有機(jī)汞主要對(duì)腦組織傷害比較大盅妹。因此對(duì)汞形態(tài)的監(jiān)測(cè)顯得尤為重要猴襟。

本文參考國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布的《GB 5009.17-2014 食品中甲基汞的測(cè)定》，通過(guò)HPLC-ICPMS聯(lián)用羔俭，采用C18柱曼庆，利用等度洗脫的方式對(duì)稀酸浸提后的大米進(jìn)行了分析，同時(shí)對(duì)樣品采取了加標(biāo)處理阁吝，且加標(biāo)回收率良好砚婆。測(cè)試結(jié)果表明，該方法能夠快速準(zhǔn)確地進(jìn)行大米樣品中汞形態(tài)的分析突勇。

1.儀器簡(jiǎn)介

本方法采用Skyray Instrument LC-310E與ICP-MS 2000E聯(lián)用装盯，采用一鍵式數(shù)據(jù)采集、精準(zhǔn)式譜圖定位及強(qiáng)大的軟件譜圖處理功能甲馋，可滿足不同的形態(tài)測(cè)試需求（如圖1）埂奈。

圖1.HPLC-ICPMS聯(lián)用測(cè)汞形態(tài)的分析儀

2.測(cè)試原理

樣品溶液經(jīng)過(guò)前處理，由HPLC進(jìn)樣口進(jìn)樣定躏，經(jīng)色譜柱分離账磺，通過(guò)霧化器霧化后送入高溫等離子體中，干燥痊远、原子化垮抗、電離，元素離子經(jīng)接口室進(jìn)入質(zhì)譜儀碧聪，通過(guò)離子透鏡系統(tǒng)借宵、質(zhì)量分析器及檢測(cè)器，檢測(cè)器對(duì)相應(yīng)元素離子做出響應(yīng)（每秒離子計(jì)數(shù)cps（counts per second）椿烂，經(jīng)軟件處理，響應(yīng)強(qiáng)度和時(shí)間組成的峰面積與相應(yīng)組分離子濃度成正比關(guān)系進(jìn)行定性定量分析着阿。

3.實(shí)驗(yàn)部分

3.1實(shí)驗(yàn)設(shè)備及試劑

液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀（江蘇天瑞儀器股份有限公司）伍配；

電子天平（BSA224S，賽多利斯）茁帚；

色譜柱（Ultimate  XB-C18跨峡，4.6×150mm，5μm）娶痕；

超純水系統(tǒng)（Millipore拦举，電阻率為18.25MΩ·cm）；

鹽酸（優(yōu)級(jí)純数截，Scharlau）盐传；

氨水（優(yōu)級(jí)純趾双，上海晶純?cè)噭┯邢薰荆?

乙酸銨（優(yōu)級(jí)純，阿拉丁化學(xué)試劑）漆粉；

L－半胱氨酸（生物純甜殖，阿拉丁化學(xué)試劑）；

甲醇（色譜純径簿，Oceanpak 色譜純?cè)噭?

汞形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)溶液（水中汞GBW（E）083186罢屈、甲基汞GBW（E）083364、乙基汞GBW（E）081524篇亭，中國(guó)計(jì)量科學(xué)院）缠捌；

超聲波（KH-500E,昆山禾創(chuàng)）；

雙功能水浴恒溫振蕩器（SHA-B,江蘇國(guó)華）译蒂；

高速離心機(jī)（TG16G,凱特）曼月。

3.2樣品前處理

稱取大米樣品1.0g（精確至0.001g），置于15mL的離心管中蹂随，加入10mL的鹽酸溶液（5mol/L）靜置過(guò)夜十嘿。后經(jīng)常溫水浴振蕩60min，于4℃下以8000r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心15min岳锁。取上層清液2mL至5mL的容量瓶中绩衷，用稀氨水調(diào)節(jié)PH到7.0，再加入0.1mL的L－半胱氨酸（10g/L）激率，最后用超純水定容至刻度并搖勻咳燕。用0.45μm的有機(jī)系濾膜過(guò)濾后，待測(cè)鉴吞。

3.3流動(dòng)相及汞形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

3.3.1流動(dòng)相的配制

60mmol/L乙酸銨＋0.1%L-半胱氨酸＋5%甲醇：稱取4.627g乙酸銨征拆，1.21gL-半胱氨酸于100mL容量瓶中，加入少量的超純水并于電熱板上加熱使其完全溶解摹椅，冷卻后定容至100mL虫棕。將定容好的溶液移入1000mL的淋洗液瓶中，同時(shí)加入50mL的甲醇梦啊，定容至1L车榆。經(jīng)0.45μm的有機(jī)系濾膜過(guò)濾后，于超聲波超聲脫氣30min炼岖，現(xiàn)用現(xiàn)配耙钉。

3.3.2汞形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)溶液：

三種汞標(biāo)準(zhǔn)溶液采用淋洗液按照梯度濃度的方式依次被稀釋為1.0μg/L、2.0.μg/L楔侣、4.0μg/L卡竣、8.0μg/L、10.0μg/L 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液株惶，同時(shí)配制5μg/L三種汞形態(tài)的單標(biāo)溶液蝴韭，用來(lái)判別每種汞形態(tài)的出峰時(shí)間够颠。

3.4實(shí)驗(yàn)條件

3.4.1色譜條件

     色譜條件詳見(jiàn)表1。

表1. HPLC分析條件

3.4.2質(zhì)譜條件

     ICP-MS分析條件見(jiàn)表2蹬耘。

表2.ICP-MS分析條件

3.5實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線

按照混合標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度1.0μg/L、2.0.μg/L减余、4.0μg/L综苔、8.0μg/L、10.0μg/L 進(jìn)樣得到色譜圖位岔，計(jì)算其峰面積如筛，以濃度和峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999抒抬，結(jié)果詳見(jiàn)圖2-1~2-3杨刨。

圖2-1.Hg²⁺標(biāo)準(zhǔn)曲線 

圖2-2.MetHg標(biāo)準(zhǔn)

圖2-3.EtHg標(biāo)準(zhǔn)曲線

3.5.2色譜分離圖

1.0μg/L、2.0.μg/L擦剑、4.0μg/L吊冬、8.0μg/L、10.0μg/L 汞形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液分離色圖譜如圖3所示婉涌，其中無(wú)機(jī)汞（Hg²⁺）量伏、甲基汞（MetHg）、乙基汞（EtHg)相對(duì)保留時(shí)間分別為118s夏坝、185s畴贵、379s，從譜圖疊加圖上可以看出花脐，三種汞形態(tài)出峰時(shí)間穩(wěn)定幅秉，且分離度較好。

圖3. 汞形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液分離圖譜

      3.5.3 檢出限

          如圖4所示為1.0μg/L汞形態(tài)混和標(biāo)準(zhǔn)溶液分離圖譜戚吕，以各形態(tài)峰附近基線處的3倍信噪比（S/N)峰高對(duì)應(yīng)的濃度作為檢出限钾趁，溶液中Hg²⁺、MetHg租江、EtHg分別為0.112μg/L、0.0718μg/L孝承、0.0698μg/L献丑。

圖4. 1.0μg/L汞形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液圖譜

3.5.4 測(cè)試結(jié)果

以大米樣品為試樣，進(jìn)行稀酸浸提侠姑，同時(shí)為了考察方法的準(zhǔn)確性创橄，并對(duì)大米試樣采取了加標(biāo)的方式箩做，測(cè)試結(jié)果詳見(jiàn)表3。

表3   大米樣品及樣品加標(biāo)結(jié)果

圖5. 大米樣品及樣品加標(biāo)5.0μg/L圖譜

4. 結(jié)論

本文建立了LC-ICPMS測(cè)試大米中汞形態(tài)的分析方法妥畏，結(jié)果表明該方法檢出限低邦邦、測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確，其加標(biāo)回收率在90%~112%之間醉蚁，線性相關(guān)系數(shù)均在0.999以上燃辖；同時(shí)汞的三種形態(tài)能夠在8min左右完成，且分離度較好网棍，該方法可滿足食品中大米樣品汞形態(tài)分析的要求黔龟。

5.參考文獻(xiàn)

 [1] 國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布 GB 5009.17-2014食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中甲基汞的測(cè)定 液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用方法，2015滥玷。